Metòd operasyon nou yo, detay, ak eksplikasyon teyorik yo pral vin direktiv pou operasyon ou, tankou plasman solisyon eleman nitritif ak flakon selil; pwosedi esterilizasyon; Pou aprann operasyon kòrèk yo, li nesesè yo peye atansyon sou yo premye fwa.
Ankouraje selil tankou elve timoun
Selil yo vrèman frajil. Li pi bon pou tcheke li chak jou pou anpeche fenomèn nòmal tankou mank dlo, gaz kabonik, echèk kouran, ak tanperati ensifizan nan kouveuz la. Li nesesè tou pou rezoud aksidan sa yo nan tan pou evite pi gwo doulè ki te koze pa eksperyans repete. .
Selil bon yo ta dwe simen nan tan
Selil yo pase an pakèt pou ke menm si yon pakèt echwe, gen yon rezèv. Li ka pa fasil pou moun an mwayèn tankou lèt la. Men, sa a se leson nan san mwen an. Yon fwa selil yo te kontamine, tout lame a te siye deyò. Lè sa a, mwen regrèt ke mwen pa t 'pwoteje grenn nan.
Chak selil gen karakteristik pwòp li yo epi yo ta dwe trete yon fason diferan.
Selil yo se menm jan ak moun, epi diferan selil yo gen diferan karakteristik kilti. Fè atansyon nan pwosesis kiltivasyon an. Liy selil diferan itilize diferan medya ak serom.
Pa egzanp, selil misk lis mwen ogmante yo trè aktif epi yo renmen yo vivan. Nan 2-3 jou, pral gen yon gwo popilasyon, epi mwen pa renmen manje ak bwè anpil. Se vrèman pi bon timoun pou elve. Selil andotelyo ak selil misk lis yo gen pèsonalite menm jan an, men yo trè ijyenik ak neglijans. Gen anpil selil sekretè nan yo, kidonk yo bezwen chanje epi lave yo souvan. Selil RAW264.7 yo tou trè kè kontan ak trè manjab. Li nesesè ba yo manje souvan. Maltèt la se ke selil yo fasil aktive. Li bon ke boutèy la ak anviwònman kote yo kiltive yo pa gen andotoksin, men li difisil pou mwen kòm yon manman satisfè yo.
Preparasyon pou travay anvan fòmasyon
Ki gen ladan manyen consommables, konfigirasyon reyaktif, tès esterilite, elatriye.
Netwayaj vèr. Pou vèr (boutèy selil, boutèy ki gen solisyon eleman nitritif, ti boutèy penisilin, elatriye), premye itilize poud lave pou netwaye (fè atansyon sou kwen ki mouri), epi apresa rense. Tranpe nan solisyon asid pou plis pase 24 èdtan, apresa rense l avèk dlo pwòp 10 fwa pou retire solisyon asid rezidyèl. Boutèy, elatriye, souke kouray pandan rense. Lè sa a, tranpe nan dlo distile doub pou 24 èdtan. Apre siye, vlope li epi sèk li nan 160 degre pou 2 èdtan.
Konfigirasyon reyaktif. Kòm yon likid pou kilti selil, jeneralman yo ka itilize plis pase dlo distile. Ak peye atansyon sou ajisteman nan valè pH.
Tès esterilite. Sitou itilize esterilizasyon filtre: tankou tripsin, antibyotik, solisyon G-418, divès kalite medya, piruvat sodyòm, glutamin, elatriye. Gen kèk ka otoklav: PBS, D-Hank, elatriye.
Reyaktif yo estoke nan aliquot
Ki gen ladan solisyon nitritif, pankreatin, serom, elatriye.
Serom se espesyalman enpòtan. Serom dwe estoke nan -20 degre. Si yon sèl boutèy pa ka itilize nan yon moman, 40-50ml ka distribye nan boutèy esteril trete asid, oswa menm estoke nan boutèy penisilin. Anjeneral, serom manifakti a bay se esteril epi li pa mande pou filtraj esteril. Si yo jwenn anpil matyè sispann nan serik la, yo ka ajoute serik la nan mwayen an epi filtre ansanm, epi serom la pa ta dwe filtre dirèkteman. (Pa gen efè sou kilti selil nan sikonstans nòmal)
Serom nan boutèy dwe dekonjle piti piti: frijidè 4 degre konplètman fonn epi divize an anbalaj. Pandan pwosesis disolisyon an, li dwe souke regilyèman (fè atansyon pa lakòz bul lè) pou fè tanperati a ak konpozisyon inifòm epi redwi ensidan an nan presipitasyon. Pa dekonjle dirèkteman nan -20 degre a 37 degre, paske tanperati a chanje twòp, sa ki ka fasilman lakòz koagulasyon pwoteyin ak presipitasyon.
Inaktivasyon chalè refere a chofe serik la konplètman dekonjle a 56 degre pou 30 minit. Apre beny dlo a monte a 56 degre, mete serom nan, tann pou tanperati a monte a 56 degre epi konte tan an, jeneralman souke li respire yon fwa chak 5 minit oswa konsa. Objektif tretman chalè sa a se dezaktive eleman konpleman yo nan serik la. Sòf si sa nesesè, tretman chalè sa a jeneralman pa fèt paske li pral lakòz yon ogmantasyon siyifikatif nan sediman ak afekte bon jan kalite a nan serom la. Peye atansyon sou efè a nan chanje serom la (ki gen ladan lo diferan) sou selil yo.
Bonjan sans esterilite
Anvan eksperyans lan, ultra-pwòp ban an te esterilize pa iradyasyon limyè UV pou 30 minit, sifas operasyon aseptik la te siye ak 70 pousan etanòl, epi fanatik ultra-pwòp ban an te limen pou kèk minit anvan operasyon eksperimantal la te kòmanse. .
Pou aprann plis sou kilti selil laboratwa, tanpri klike sou: http://www.shjasw.com/
