Plak kilti selil yo souvan itilize ak consommables enpòtan nan eksperyans kilti selil paske yo ka ekonomize tan ak materyèl reyaktif pou eksperyans selil yo, epi yo ka mete kanpe plizyè varyab dinamik an menm tan pou fasilite obsèvasyon ak deteksyon.
plak kilti
1. Kouvèti yo nan 96, 24-byen kilti plak oswa plat Petri yo trè ki lach, ki se pratik pou vantilasyon, men yo pral bakteri, mwazi ak lòt polyan tou glise nan?
Repons: (1) Kouvèti a trè lach epi li fè pati kilti semi-ouvè. Objektif sa a se pou respire (aktyèlman, pou pèmèt CO2 deyò plat kilti a dwe konplètman echanje ak plat kilti a kenbe valè pH mwayen an).
(2) Gen avantaj ak dezavantaj, ki ogmante posiblite pou polisyon. Anplis de sa, sa lakòz likid la nan plat Petri a evapore, ki se remakab pou dòz egzak nan dwòg. Se konsa, de mezi sa yo nesesè:
a) Lè a nan enkibatè a dwe pwòp (limyè iltravyolèt regilye, fwote alkòl, epi enkibatè a ta dwe limen ak etenn osi piti ke posib)
b) Yo dwe kenbe imidite nan enkibatè a nan 100 pousan toutan (yon koule kote dlo distile esteril yo mete nan enkibatè a). Peye atansyon sou operasyon aseptik!
2. Selil mwen yo vaksinen sou plak kilti a, epi selil yo toujou rasanble nan pati periferik la. Kisa mwen ta dwe fè? Mwen wè selil kèk kamarad nan zam yo rasanble nan mitan. Èske se yon pwoblèm ak kalite plak la?
A: Ki jan ou melanje selil ou yo? Èske li pipèt mouche oswa souke plak kilti a? Si li se lèt la, epi li se souke nan yon sèk, li trè posib ke selil yo pral jete nan pati ki antoure akòz fòs la santrifujeur, sa ki lakòz nan mitan an nan selil yo. Mwens, plis pase kat semèn! Ou ka eseye li tèt ou!
Yon bon fason: anvan ou kiltive plak grenn lan, mete plak kilti a nan enkibatè a pou kèk èdtan nan saturation ak Lè sa a, retire li. Lè simen selil yo, fòs la ta dwe limyè. Ou ka sèvi ak yon goutteur sou bò twou plak kilti a dousman Ajoute pou pèmèt sispansyon selil la koule nan pwi plak la, ak selil kiltive yo grandi anpil menm jan. Sonje pa janm souke osilator la oswa selil ou yo pral rasanble ansanm jan ou te di.
3. Selil mwen yo pase nòmalman, men lè yon sèl kalite antre nan yon plak sis-puit (kèlkeswa adisyon dwòg ak kontwòl), toujou gen de oswa twa pwi (o aza) selil ki pa grandi byen, ki piti, epi ki sanble. pou yo kase. Èske gen moun ki rankontre sa a? Ki rezon an?
A: Li ka gen rapò ak tanperati likid ou ajoute a. Si selil ou yo te jis pran soti nan chanje mwayen an epi ajoute mwayen an, epi yo pran mwayen an tou soti nan frijidè a 4 degre byento, li fasil pou selil yo jele nan lanmò. Li rekòmande pou ou pi byen enkube mwayen an nan kouveuz la pou 15 minit an premye.
Anplis de sa, li gen rapò tou ak eta kwasans selil ou yo. Selil anvan dòz yo ka enkube ak konsantrasyon serik segondè. Asire w ke selil yo nan bon kondisyon.
Oswa li ka enkube nan yon beny dlo 37-degre, oswa pwoblèm nan nan plak kilti a li menm, ou ka eseye yon lòt plak kilti. Yon lòt posibilite se pwoblèm nan eta selil, ajiste konsantrasyon nan serom lè simen plak la.
4. Nan jou ki sot pase yo, mwen te itilize yon plak kilti sis-pi pou vaksine selil yo. Apre kiltive pou 24 èdtan, mwen chanje mwayen an. Anvan chanje mwayen an, mwen te obsève ke selil yo te respekte miray la, ak eta a te trè bon. Apre chanje mwayen an, mwen itilize mikwoskòp la imedyatman. Yo te obsève ke prèske mwatye nan selil yo nan chak pi te montre yon eta tou pre lanmò. Selil yo vin piti anpil epi yo pwodui anpil debri, pandan ke lòt mwatye selil yo nòmal, gen yon basen vèsan ant selil nòmal ak selil nòmal, mwatye sèk anwo a bon, mwatye sèk ki pi ba a pa bon, ki jan yo ye. sa? Ki pwoblèm nan?
A: Ou ka wè si gen nenpòt nan rezon sa yo
a. Plak kilti a pa mete orizontal;
b. Kouman sou mwayen kilti ou a, si mwayen kilti a ekspire, selil yo pa pral respekte. Eseye yon mwayen ki fèk prepare
c. Li ka pwoblèm nan plak la. Li pa gen pwoblèm pou chanje plak yon lòt mak oswa itilize boutèy kilti a.
d. Èske w te peye atansyon sou enfliyans fanatik la lè w chanje mwayen an, espesyalman lè gen anpil plak kilti ki bezwen ranplase, li fasil pou lakòz selil yo retresi ak rupture akòz van ak pèt dlo. Si se konsa, mwayen an ta dwe chanje youn pa youn, epi ou pa bezwen pè gaspiye pipèt la, peye atansyon sou efikasite nan operasyon an!
5. Sa te fè kat jou depi selil yo te dijere ak vaksinen nan yon plak 24-pi, epi pati mitan chak pi te toujou plen. Yo te lave mwayen an ak PBS chak jou, e menm sitiyasyon an te rive lè yo te chanje mwayen an jou kap vini an. Bor yo byen long ak sant la plen selil ki mouri?
Repons: Si selil yo dans alantou epi yo ra nan mitan an, gen apeprè rezon sa yo:
Mwayen an te ajoute twò piti. Sitou akòz pwoblèm nan nan tansyon likid.
Kit gen mwens dlo nan pati anba enkibatè a;
Souke apre simen selil yo te twòp. Selil yo distribye alantou akòz fòs santrifujeur.
Kle a pou konnen si selil yo distribye egalman se ke chak kalite selil gen diferans endividyèl, epi operasyon selil lòt moun ka pa apwopriye pou ou. Se konsa, ou dwe eksplore poukont ou epi jwenn yon seri règ ki inik nan selil pwòp ou yo. Ou gen eksperyans sa a:
(1) Tout sispansyon selil yo dwe simen yo dwe melanje ak yon pipèt anvan simen.
(2) Dapre dosye yo, volim likid plak 24-byen an se 1ml, an reyalite, volim 1ml ase.
(3) Lè w vaksinen, ajoute echantiyon an tou dousman, epi sonje vire pwent pipèt la yon ti kras. Echantiyon an pa ka ajoute twò vit pou evite selil yo akimile nan yon pwen adisyon echantiyon, epi peye atansyon sou ajoute echantiyon nan diferan pati, se sa ki, pandan y ap ajoute zam mobil lan. Tèt, atifisyèlman fè selil yo gen tandans yo dwe respire distribye. Lè w fè sa, gen efè pou distribye selil yo respire.